Tim Guinee est né à Los Angeles, Californie (États-Unis) issu d'une famille de 6 enfants. Il commence le théatre à l'adolescence au lycée de Houston avant de faire partie d'une troupe.
Il a déjà participé à près d'une centaine de productions depuis 1986 dont Blade, Les Experts, Médium, Smallville, Stargate, NCIS, 24, Numbers en enfin Iron-Man 2 en 2010.